Clostridium difficile Toxin A/B Gen (C.diff)
Produktname
HWTS-OT031A Nukleinsäure-Nachweiskit für das Clostridium difficile Toxin A/B-Gen (C.diff) (Fluoreszenz-PCR)
Zertifikat
CE
Epidemiologie
Clostridium difficile (CD), ein grampositives, anaerobes, sporenbildendes Bakterium, ist einer der Hauptverursacher nosokomialer Darminfektionen. Klinisch werden etwa 15–25 % der antibiotikabedingten Diarrhö, 50–75 % der antibiotikabedingten Kolitis und 95–100 % der pseudomembranösen Enteritis durch eine Clostridium-difficile-Infektion (CDI) hervorgerufen. Clostridium difficile ist ein bedingt toxinbildender Erreger, der sowohl toxinbildende als auch nicht-toxinbildende Stämme umfasst.
Kanal
| FAM | tcdAGen |
| ROX | tcdBGen |
| VIC/HEX | Interne Kontrolle |
Technische Parameter
| Lagerung | ≤-18℃ |
| Haltbarkeit | 12 Monate |
| Probenart | Hocker |
| Tt | ≤38 |
| CV | ≤5,0 % |
| LoD | 200 KBE/ml |
| Spezifität | Bei Verwendung dieses Kits zum Nachweis anderer intestinaler Krankheitserreger wie Escherichia coli, Staphylococcus aureus, Shigella, Salmonella, Vibrio parahaemolyticus, Streptokokken der Gruppe B, nicht-pathogene Stämme von Clostridium difficile, Adenovirus, Rotavirus, Norovirus, Influenza-A-Virus, Influenza-B-Virus und menschlicher genomischer DNA sind alle Ergebnisse negativ. |
| Anwendbare Instrumente | Applied Biosystems 7500 Echtzeit-PCR-Systeme Applied Biosystems 7500 Fast Real-Time PCR-Systeme QuantStudio®5 Echtzeit-PCR-Systeme SLAN-96P Echtzeit-PCR-Systeme (Hongshi Medical Technology Co., Ltd.) LightCycler®480 Echtzeit-PCR-System LineGene 9600 Plus Echtzeit-PCR-Detektionssystem (FQD-96A，HangzhouBiotechnologie) MA-6000 Echtzeit-Quantitativer Thermocycler (Suzhou Molarray Co., Ltd.) BioRad CFX96 Echtzeit-PCR-System BioRad CFX Opus 96 Echtzeit-PCR-System |
Arbeitsablauf
Option 1.
Geben Sie 180 μL Lysozympuffer zum Präzipitat (verdünnen Sie das Lysozym mit Lysozymverdünnungsmittel auf 20 mg/mL), pipettieren Sie gut durch und inkubieren Sie die Lösung über 30 Minuten bei 37 °C. Geben Sie 1,5 mL RNase-/DNase-freie Lösung in ein Zentrifugenröhrchen und fügen Sie die Lösung hinzu.180 μL Positivkontrolle und Negativkontrolle nacheinander hinzufügen.10Geben Sie μL der internen Kontrolle zur zu testenden Probe, der Positivkontrolle und der Negativkontrolle nacheinander hinzu. Verwenden Sie anschließend das Nukleinsäure-Extraktions- oder Reinigungsreagenz (YDP302) von Tiangen Biotech (Beijing) Co., Ltd. für die DNA-Extraktion der Probe und befolgen Sie die Gebrauchsanweisung für die einzelnen Schritte genau. Verwenden Sie DNase-/RNase-freies H2O für die Elution, und das empfohlene Elutionsvolumen beträgt 100 μL.
Option 2.
Man nehme 1,5 ml RNase-/DNase-freies Zentrifugenröhrchen und gebe nacheinander 200 μl der Positivkontrolle und der Negativkontrolle hinzu.10Geben Sie μL der internen Kontrolle zur zu testenden Probe, der Positivkontrolle und der Negativkontrolle nacheinander hinzu und verwenden Sie das Macro & Micro-Test Viral DNA/RNA Kit (HWTS-3004-32, HWTS-3004-48, HWTS-3004-96) und den automatischen Nukleinsäureextraktor von Macro & Micro-Test (HWTS-3006). Die Extraktion muss genau nach Gebrauchsanweisung erfolgen; das empfohlene Elutionsvolumen beträgt 80 μL.
